本研究采用經(jīng)典的遺傳毒理學(xué)試驗(yàn)方法：小鼠骨髓微核率試驗(yàn)、小鼠精子畸形分析試驗(yàn)，鼠傷寒沙門氏桿菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)、倉鼠肺成纖維細(xì)胞(CHL)染色體畸變?cè)囼?yàn)， 以曬青毛茶為對(duì)照，對(duì)不同貯藏年份的共5種代表性普洱茶產(chǎn)品進(jìn)行了遺傳毒性安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)，以檢測(cè)其是否具有潛在的致突變和致癌毒性。?

六個(gè)茶樣的小白鼠骨髓微核試驗(yàn)結(jié)果（如表） ?

普洱茶遺傳毒性——微核試驗(yàn)結(jié)果

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微核試驗(yàn)是根據(jù)分裂間期細(xì)胞內(nèi)殘留染色體斷片或整個(gè)染色體組成的一種圓形或橢圓形的小體，來判斷化學(xué)物質(zhì)引起染色體異常作用的一種簡便的哺乳動(dòng)物體內(nèi)試驗(yàn)。典型的微核呈圓形，直徑相當(dāng)于紅細(xì)胞直徑的1/5～1/20，染色與核質(zhì)相同。微核出現(xiàn)是一種染色體異常現(xiàn)象，微核檢出率增高，可反映染色體畸變情況。由于其測(cè)定方法較簡便、快速可靠，所以已作為化學(xué)致突變?cè)囼?yàn)中常用的一種篩檢方法。 ?

表格上可以看出：經(jīng)六個(gè)茶樣灌胃處理的昆明種小白鼠，試驗(yàn)結(jié)果均為陰性。表明六個(gè)茶樣都不存在致染色體斷裂的致突變性，各茶樣處理的小白鼠骨髓微核發(fā)生率均略低于空白對(duì)照，提示所試茶樣均具有一定的降低微核自然發(fā)生率的功能，即所試普洱茶樣具有一定的抗突變和抗癌的作用！有大量研究報(bào)道表明茶葉及其多酚類以及兒茶素類具有抗染色體損傷的功能，也有人研究發(fā)現(xiàn)綠茶可以降低某些重金屬導(dǎo)致的微核率的增加。?

普洱茶遺傳毒性--小白鼠精子畸形檢測(cè)試驗(yàn)結(jié)果
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精子畸形是指精子形狀的畸形和畸形精子數(shù)量增多，畸形精子增多的原因可能是由于在精子形成過程中， 致突變?cè)词咕有纬捎嘘P(guān)的基因發(fā)生突變或某些特異染色體的重排。精子畸形試驗(yàn)根據(jù)受試化學(xué)物如能影響實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的精子成熟過程，則可觀察到精子頭部或尾部的形態(tài)變化。?

精子畸形試驗(yàn)是檢驗(yàn)生殖細(xì)胞染色體毒性的一種手段，A、B、C、D、E、F六個(gè)茶樣按各自得1/2 LD50、1/6 LD50、1/20 LD50各劑量處理后，其畸形精子率與陰性對(duì)照沒有顯著性差異，而陽性對(duì)照則比陰性對(duì)照有顯著性增加，因此判定六個(gè)茶樣各劑量的畸形精子檢測(cè)結(jié)果為陰性，四茶樣所試劑量對(duì)生殖細(xì)胞沒有致畸變作用。?

Ames試驗(yàn)結(jié)果?

鼠傷寒沙門氏菌營養(yǎng)缺陷型回復(fù)突變?cè)囼?yàn)通常簡稱Ames試驗(yàn)，它是1975年由Ames本人完整地提出的用微生物檢測(cè)致突變物的方法，是目前檢測(cè)基因突變最常用方法之一。Ames法基本原理是鼠傷寒沙門氏桿菌的突變型(即組氨酸缺陷型)菌株在無組氨酸的培養(yǎng)基上不能正常生長，只有少數(shù)自發(fā)回變菌落生長。在有組氨酸的培基上可以正常生長，但在無組氨酸的培基中如有能引起該菌基因堿基置換或移碼突變的致突變劑存在，則突變型發(fā)生回復(fù)突變，回變?yōu)榻M氨酸非缺陷型野生型，即又可在無組氨酸培基上生長，使細(xì)菌生長增多。某些致突變劑需要激活后才能引起沙門氏菌突變型發(fā)生回復(fù)突變，由大鼠肝勻漿制備的哺乳動(dòng)物體內(nèi)肝微粒體多功能氧化酶S9混合液進(jìn)行受試化學(xué)物質(zhì)的代謝激活作用。測(cè)定致突然變異性物質(zhì)所引起的復(fù)歸突然變異頻度，即可以檢查受試物是否為致突變物質(zhì)。 ?

根據(jù)Ames試驗(yàn)結(jié)果判定準(zhǔn)則，當(dāng)試驗(yàn)受試物誘變的回復(fù)菌落數(shù)(X±S)增加，為自發(fā)對(duì)照的2倍或以上，并具有劑量效應(yīng)或某一測(cè)試點(diǎn)可重復(fù)的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義增加時(shí)為陽性，從六茶樣四菌株各水平實(shí)驗(yàn)結(jié)果看，六個(gè)茶樣四菌株均顯陰性。因此可以得出結(jié)論為普洱茶及烘青綠茶對(duì)TA98、TAl00、TA97及TAl02四菌株不存在明顯的抑菌現(xiàn)象，不會(huì)誘導(dǎo)四菌株發(fā)生回復(fù)突變，三種類型普洱茶及烘青綠茶中沒有引起四菌株基因堿基置換或移碼突變的致突變劑存在。?

CHL染色體畸變?cè)囼?yàn)結(jié)果?

用CHL染色體畸變?cè)囼?yàn)評(píng)價(jià)F、E兩個(gè)普洱茶樣的致突變性本試驗(yàn)結(jié)果表明，無論是24ｈ及48ｈ收獲細(xì)胞進(jìn)行染色體畸變分析，空白對(duì)照、溶媒對(duì)照、S9混合液對(duì)照染色體畸變率在正常范圍，在S9活化和非活化兩種測(cè)試條件下，普洱茶E在試驗(yàn)設(shè)計(jì)濃度范圍內(nèi)染色體畸變率都在正常范圍，證明了普洱茶E、F在設(shè)計(jì)劑量條件下對(duì)CHL細(xì)胞沒有致突變性。